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核酸提取的基本步驟純化原則和要求及其工作原理

更新時間:2022-04-19點擊次數(shù):1838
  核酸提取儀也叫核酸純化儀是應用配套的試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器。最近幾年才得到應用推廣的儀器。核酸是核苷酸單體聚合而成的生物大分子,是生物細胞最基本和最重要的成分。一般認為,生物進化即始于核酸,因為在所有生命物質(zhì)中只有核酸能夠自我復制。核酸是生物遺傳信息的貯藏場所和傳遞者。核酸分為核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)兩大類。這兩類核酸有某些共同的結(jié)構(gòu)特點,但生物功能不同。
  核酸提取的基本步驟
  1、裂解細胞,釋放核酸。使用裂解液破壞樣品細胞結(jié)構(gòu),從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中;
  2、核酸的分離與純化。需要將與核酸結(jié)合的蛋白質(zhì)以及多糖、脂類等生物大分子和其他不需要的核酸分子去除;
  3、核酸的濃縮、沉淀;
  4、純化核酸。純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分,如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)*分離的過程。
  核酸提取純化原則和要求
  1、需要保證核酸一級結(jié)構(gòu)的完整性,為下游實驗做準備;
  2、排除其它核酸分子的污染(提取DNA時排除RNA的干擾,反之亦然);
  3、核酸樣品中沒有對酶有抑制作用的有機溶劑和高濃度的金屬離子;
  4、將核酸樣品中其它生物大分子如蛋白質(zhì)、多糖和脂類分子的污染降到低程度。
  
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